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wEstErn Blotting 中内参的作用是什么

你好!本人还没开始做western,以下见解纯属理论上的看法,估计错误多多.恳请批判.内参的作用:控制上样量,使上样量一致,以便目标蛋白具有可比性.上样量一致,一般是总蛋白的上样量一致,测定总蛋白,这是上样量一致的粗调节.但如果人为或其他原因导致上样量有偏差,这时就必须用内参加以控制,这是上样量的微调节.以上是小弟一点理解,请指正 仅代表个人观点,不喜勿喷,谢谢.

Western Blot为什么必须要用内参 要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为WesternBlot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然

β-Actin是管家基因,在不同细胞中均有表达.用其作为内参,是指在western实验中通过内参的含量的多少来调整样品之间的上样量,相当于作为标准曲线的作用,只有调整样品的上样量使得内参的含量一致才能比较不同蛋白间表达量的差别.western使用的抗体视个人所需不同,可以是兔抗、羊抗、鼠抗,做之前要先查阅相关资料

看到你的目的蛋白条带在30和35kD之间,就可以初步断定是你的目的蛋白.2. 内参呢,内参也叫看家基因,在组织或细胞中都会表达,且表达量在不同组织或细胞中几乎是相同的,一般有β-ACTIN,GAPDH等.其作用有二,1. 是看提取蛋白质量

要检测一个基因的表达产物是否正确,或者比较表达产物量的相对变化,首选方法是Western Blot.因为Western Blot操作相对简单方便,既可以定性分析表达产物,同时还可以指示目的蛋白量的相对变化.虽然,顺利的时候Western Blot做起来

GAPDH和B-ACTIN的区别:1、定义不同:GAPDH:GAPDH或G3PDH是甘油醛-3-磷酸脱氢酶.B-ACTIN:即“肌动蛋白”,是细胞的一种重要骨架蛋白.2、分布方式不同:GAPDH:广泛分布于各种组织中的细胞.B-ACTIN:分布在骨架当中

用于检测混合样品中的一种或多种抗原.SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳可根据分子大小分离样品蛋白,沿着电泳方向产生一系列的蛋白条带.因为凝胶基质使得大分子蛋白难于进入,所以要进行抗原抗体反应首先需将凝胶中的蛋白转移到较易于进入的介质,该过程称为印迹.将凝胶与硝酸纤维膜或尼龙膜紧挨,加场以使蛋白转移到膜上,并使两者相结全,这种特殊形式的印迹即为:western blotting

有点作用,我就下载了然后打印出来了,可以看下,当作检验,告诉你复习方向

描述有问题.抗体检测的是抗原,所以你检测的是β-actin 做western很重要的一点就是要有一个参照,比如你要检测淋巴细胞某个蛋白的表达,甚至它的变化(比如对某个细胞因子的反应),这时β-actin起到几个作用: 1、如果目的蛋白检测不

一.免疫印迹法 免疫印迹法(immunoblotting test,IBT)亦称酶联免疫电转移印斑法(enzyme linked immunoelectrotransfer blot,EITB),因与Southen早先建立的检测核酸的

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